PDF下载 ( 2061 KB)
Value of combined measurement of serum growth differentiation factor 15 and alpha-fetoprotein in the diagnosis of hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma
-
摘要: 目的探讨血清生长分化因子15（GDF15）和AFP联合检测对诊断HBV感染相关肝细胞癌（HCC）的临床价值。方法选取2019年3月1日-2019年9月1日在武汉大学人民医院诊治的患者和健康体检者共225例,其中HBV感染导致的HCC患者（HCC组） 97例,慢性乙型肝炎患者（CHB组） 41例,健康体检者（NC组） 87例,分别测定三组人群的GDF15和AFP水平。计量资料采用单样本Kolmogorov-Smirnov法检验各组数据是否符合正态性,正态分布资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;非正态分布资料多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,两两比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料采用χ2检验。采用二元logistic回归分析得到GDF15和AFP联合的回归模型,并绘制GDF15和AFP单独或联合检测的ROC曲线,计算曲线下面积及灵敏度、特异度和约登指数。结果 HCC组、CHB组和NC组的GDF15和AFP水平差异均有统计学意义（χ2值分别为53. 77、119. 12,P值均<0....Abstract: Objective To investigate the clinical value of combined measurement of serum growth differentiation factor 15( GDF15) and alpha-fetoprotein( AFP) in the diagnosis of hepatocellular carcinoma( HCC) associated with hepatitis B virus( HBV) infection. Methods A total of 225 subjects who received treatment or underwent physical examination in Renmin Hospital of Wuhan University from March 1 to September 1,2019,were enrolled,among whom there were 97 patients with HCC caused by HBV infection( HCC group),41 patients with chronic hepatitis B( CHB group),and 87 healthy individuals( NC group),and the levels of GDF15 and AFP were measured for all three groups. The one-sample Kolmogorov-Smirnov test was used to determine whether the data were normally distributed or not; an analysis of variance was used for comparison of normally distributed data between multiple groups,and the least significant difference t-test was used for further comparison between two groups; the Kruskal-Wallis H test was used for comparison of non-normally distributed data between multiple groups,and the Mann-Whitney U test was used for further comparison between two groups. The chi-square test was used for comparison of categorical data. A binary logistic regression analysis was used to obtain the regression model of GDF15 and AFP; the receiver operating characteristic( ROC) curve was plotted for GDF15 and AFP used alone or in combination,and the area under the ROC curve( AUC),sensitivity,specificity,and Youden index were calculated. Results There were significant differences in the levels of GDF15 and AFP between the HCC group,the CHB group,and the NC group( χ2= 53. 77 and 119. 12,both P < 0. 01); the HCC group had a significantly higher level of GDF15 than the CHB group and the NC group( both P < 0. 01),the HCC group and the CHB group had a significantly higher level of AFP than the NC group,and the HCC group had a significantly higher level of AFP than the CHB group( all P < 0. 01). The ROC curve analysis showed that GDF15 alone had an AUC of 0. 752,a sensitivity of 74. 0%,and a specificity of 68. 3%,AFP alone had an AUC of 0. 660,a sensitivity of 45. 8%,and a specificity of 85. 4%,and GDF15 combined with AFP had an AUC of 0. 816,a sensitivity of 88. 4%,and a specificity of 68. 5%. Conclusion Combined measurement of GDF15 and AFP can improve the diagnostic efficiency for HBV-related HCC and has a high clinical value.
-
门静脉高压是失代偿期肝硬化患者的主要临床表现之一，其导致的食管胃静脉曲张破裂出血、肝性脑病、顽固性腹水等并发症是患者死亡的重要原因[1]。大量研究表明肝静脉压力梯度(hepatic venous pressure gradient, HVPG)可反映门静脉高压的严重程度。2021年Baveno Ⅶ国际共识[2]推荐，对于病毒性肝炎相关肝硬化和酒精性肝硬化患者，HVPG值为诊断门静脉高压的金标准。Baveno Ⅶ国际共识[2]和美国肝病学会2016版指导意见[3]均明确指出和强调了HVPG对门静脉高压危险分层的作用和预后预测价值，HVPG≥20 mmHg提示肝硬化静脉曲张出血患者的止血治疗失败率和死亡风险升高[4]。然而，HVPG测定是一项有创性操作，且对操作者技术水平和医疗设备有一定要求，并在测定过程中可能引起一过性的心律失常和迷走神经反应等不良反应，这些不足在很大程度上限制了HVPG的临床应用和推广。
近年来，非侵入性测量肝组织弹性的方法得到了发展。许多研究[5-7]已证实肝炎患者和肝硬化代偿期患者的肝脏硬度(liver stiffnes, LS)与HVPG相关，但对于肝硬化失代偿期患者仍欠缺研究，LS对肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血二级预防的患者预测能力尚不明确。此外，以往的大多数研究使用瞬时弹性成像(transient elastography, TE)来评估LS，少有研究探讨声脉冲辐射力成像技术(acoustic radiation force impulse, ARFI)检测的LS值的预测作用。因此，通过ARFI测量门静脉高压患者LS和脾脏硬度(spleen stiffness, SS)，验证LS、SS与HVPG的相关性，在临床上具有重要意义。
1. 资料与方法
1.1 研究对象
选取2013年4月—2021年6月在南京鼓楼医院消化内科同时接受HVPG测定及ARFI测量LS、SS的病毒性或酒精性失代偿期肝硬化患者。
1.2 纳入标准
(1) 确诊病毒性肝炎相关肝硬化或酒精性肝硬化失代偿期；既往食管胃底静脉曲张破裂出血病史。(2)年龄18~75岁。(3)在本院行经颈静脉HVPG测定，并于术前3 d内行ARFI测定LS、SS。术前3 d检验血常规、凝血功能、肝功能、肾功能，腹部彩超评估肝右叶斜径、脾肋间直径、门静脉血流速度(portal vein flow rate, PVF)、脾静脉直径(splenic vein diameter, SVD)，术前或术后1周内的内镜评估食管胃底静脉曲张程度。
1.3 排除标准
(1) 合并肝癌或肝外肿瘤；(2)严重的心、肺、肝、肾功能不全，或严重出血性疾病或局部、全身感染、甲状腺功能低下、雷诺综合征、周围血管疾病等；(3)脾脏切除患者；(4)严重门静脉血栓患者；(5)计划怀孕或已怀孕或哺乳的妇女。
1.4 观察指标
根据既往研究[1]，HVPG≥20 mmHg提示早期再出血及高治疗失败率，故在本研究中，根据术中测定的HVPG值，将纳入患者分为严重门静脉高压组(SPH组，HVPG≥20 mmHg)和非严重门静脉高压组(非SPH组，HVPG＜20 mmHg)。收集纳入患者的临床资料，包括性别、年龄、既往史、HVPG值、LS、SS、血常规、凝血功能、肝功能、肾功能，腹部彩超评估肝右叶斜径、脾肋间直径、SVD、PVF、内镜下静脉曲张程度等指标。
1.5 统计学方法
应用SPSS 22.0软件进行统计分析。符合正态分布的计量资料以x ±s表示，2组间比较采用t检验；不符合正态分布的计量资料以M(P25~P75)表示，2组间比较采用Mann-Whitney U秩和检验。计数资料2组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Pearson检验。用Pearson r系数评估不同无创检测指标与HVPG的相关性强度。若r＜0.3，提示弱强度相关；若0.3≤r≤0.5，提示中等强度相关；若r＞0.5，说明高强度相关。采用Logistic回归分析不同无创检测指标与SPH发生风险之间的关系。绘制不同无创指标预测HVPG≥20 mmHg发生的受试者工作特征曲线(ROC曲线)并计算曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、最大约登指数及对应的临界值，以评估各指标对SPH的预测价值。P＜0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 基线资料比较
共纳入符合条件的受试者88例，其中SPH组24例，非SPH组64例。两组患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、凝血酶原时间、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、血钠、血肌酐、Child-Pugh肝功能分级等比较，差异均无统计学意义(P值均＞0.05)(表 1)。
表 1 受试者基线资料Table 1. Baseline of the patients included指标 所有患者(n=88) 非SPH组(n=64) SPH组(n=24) 统计值 P值 男/女(例) 65/23 48/16 17/7 χ2=0.157 0.79 年龄(岁) 53.93±11.39 54.35±12.08 53.54±9.68 t=0.132 0.90 病因(病毒性/酒精性，例) 76/12 56/8 20/4 χ2=0.257 0.73 肝右叶斜径(cm) 12.20±1.48 12.56±1.28 12.57±1.66 t=-1.245 0.22 内镜下静脉曲张程度(轻/中/重，例) 4/19/65 3/14/47 1/5/18 χ2=0.025 0.99 白细胞计数(×109/L) 2.25(1.70~3.30) 1.90(1.55~3.30) 2.50(2.05~3.20) Z=-1.918 0.06 血红蛋白(g/L) 86.64±26.66 82.35±25.97 86.64±26.66 t=0.124 0.90 血小板计数(×109/L) 59.49±33.65 60.10±28.95 57.35±30.83 t=0.367 0.72 凝血酶原时间(s) 14.89±2.74 14.35±1.64 15.90±3.10 t=-1.772 0.08 国际标准化比值 1.31±0.20 1.25±0.15 1.39±0.26 t=-1.525 0.07 谷丙转氨酶(U/L) 22.75(16.40~29.40) 24.75(15.90~29.00) 18.75(15.85~29.40) Z=-0.932 0.35 谷草转氨酶(U/L) 26.75(21.25~35.55) 26.80(22.35~36.25) 23.15(20.10~31.50) Z=-1.466 0.14 总胆红素(μmol/L) 16.90(11.00~22.35) 15.85(10.10~20.10) 18.70(13.10~31.70) Z=-1.743 0.08 白蛋白(g/L) 35.43±4.77 36.43±4.45 33.96±5.31 t=1.155 0.25 血肌酐(μmol/L) 67.14±19.23 64.15±14.74 64.29±21.46 t=0.787 0.43 血钠(mmol/L) 141.20±2.60 141.16±3.13 141.23±2.84 t=-0.137 0.89 腹水(有/无，例) 30/58 25/39 5/19 χ2=2.581 0.13 Child-Pugh评分 6.85±1.32 6.40±1.05 7.25±1.29 t=-1.982 0.05 Child-Pugh分级(A/B/C，例) 37/48/3 31/32/1 6/16/2 χ2=5.517 0.06 2.2 不同无创测定指标与HVPG的相关性分析
相关分析结果显示HVPG与LS呈中等强度正相关(r=0.458，P＜0.001)；而SS(r=0.117，P=0.300)、PVF(r=0.010，P=0.940)、SVD(r=-0.090，P=0.420)与HVPG不相关。
2.3 SPH组和非SPH组不同无创测定指标的比较
结果显示，两组间LS比较差异有统计学意义(P＜0.05)，而SS、PVF、SVD两组间比较，差异均无统计学意义(P值均＞0.05)(表 2)。
表 2 SPH组和非SPH组不同无创测定指标的比较Table 2. The comparison of different noninvasive indexes between SPH group and non-SPH group指标 所有患者(n=88) 非SPH组(n=64) SPH组(n=24) t值 P值 LS(m/s) 2.00±0.43 1.88±0.34 2.33±0.50 -3.970 ＜0.01 SS(m/s) 3.48±0.53 3.46±0.56 3.54±0.46 -0.612 0.54 PVF(m/s) 27.56±9.53 27.65±9.59 27.33±9.58 0.139 0.89 SVD(cm) 1.19±0.30 1.18±0.30 1.22±0.30 -0.430 0.67 2.4 SPH发生风险的Logistic回归分析
将LS、SS、PVF、SVD根据中位数水平转化为二分类变量，采用Logistic回归分析不同LS、SS、PVF、SVD、肝功能(Child-Pugh分级)水平下SPH的发生风险。结果显示，以低LS组为参考，在调整各危险因素后，高LS组SPH发生风险为低LS组的3.941倍(95%CI：1.245~12.476，P=0.020)(表 3)。
表 3 SPH发生风险的Logistic回归分析Table 3. Logistic regression analysis of SPH risk无创指标 OR 95%CI P值 LS 3.941 1.245~12.476 0.020 SS 0.840 0.281~2.507 0.754 PVF 0.542 0.192~1.527 0.246 SVD 1.452 0.497~4.241 0.496 Child-Pugh分级 B级 0.184 0.011~3.192 0.245 C级 0.402 0.027~5.948 0.507 注：LS≤1.925 m/s赋值为0，LS＞1.925 m/s赋值为1；SS≤3.50 m/s赋值为0，SS＞3.50 m/s赋值为1；PVF≤25.85 m/s赋值为0，PVF＞25.85 m/s赋值为1；SVD≤1.12 cm赋值为0，SVD＞1.12 cm赋值为1；Child-Pugh分级以Child-Pugh A级为参考。 2.5 不同无创指标预测SPH的ROC曲线
绘制不同无创指标预测SPH的ROC曲线(图 1)。其中LS预测SPH发生的AUC为0.751，最佳临界值为2.295 m/s，敏感度为54.17%，特异度为90.63%。
图 1 不同无创指标预测SPH发生风险的ROC曲线Figure 1. ROC curve of different non-invasive index to predict the risk of SPH3. 讨论
由于失代偿期肝硬化患者存在显著的高死亡风险，因此精确评估、风险分层、个体化干预显得尤为重要[8]。对于失代偿期肝硬化患者，基于HVPG的风险分层进行个体化干预治疗在Baveno Ⅶ共识[2]中被推荐，即HVPG≥20 mmHg可考虑早期经颈静脉肝内门体分流术，而对于低危患者首选非选择性β受体阻滞剂联合内镜治疗进行二级预防。然而，HVPG检查属于有创操作，有一定技术难度，且患者接纳程度相对较低。因此，对无创指标的预测诊断模型的探索非常必要。近年来国内外学者在门静脉高压的预测诊断模型研究方面进行了诸多探索，其中比较有代表性的包括门静脉影像学模型、血流动力学评分模型等，但多数仍处于研究阶段且缺乏外部验证，不能广泛应用于临床[9]。
近几年来，随着超声技术的发展，LS和SS主要测量方式包括TE、实时弹性成像、ARFI。许多研究表明，LS和SS可能是评估肝硬化失代偿期风险的潜在的无创指标[2, 10]。既往研究[11]表明原发性硬化性胆管炎患者随着时间推演肝纤维化的程度增加，LS逐渐增加，且LS与发生并发症的风险呈正相关。既往一项国外Meta分析[12]发现：TE测得的LS在诊断临床显著门静脉高压方面具有出色的诊断性能，AUC为0.93；TE测得的LS诊断食管静脉曲张的AUC为0.84。Baveno Ⅶ共识[2]提出，应用TE检测LS可能有助于对门静脉高压患者的门静脉压力进行评估。与此同时，既往有大样本临床研究[13-14]得出结论：结合LS、血小板计数和脾脏直径的评分(即LSPS评分，TE测得LS×脾肋间直径/外周血血小板计数)在门静脉高压的诊断中也具有较高的预测价值；国内研究[15]表明肝脾硬度联合血清学检测对重度食管胃底静脉曲张具有较好的预判价值。
目前TE已被广泛用于LS和SS的评估，但TE在技术上存在局限性，其在大量腹水、肥胖、肋间隙狭窄的患者中应用受限。欧洲超声医学与生物学联合会(EFUSUMB)指南[16]提出，TE不能用于肝周腹水患者。而失代偿期肝硬化患者多发生腹水，因此，尽管TE在代偿性肝硬化患者中表现良好，但在失代偿期肝硬化患者中存在不确定性。
ARFI是一种新兴的、以超声为基础的无创评估组织弹性的方法。其检测原理为利用调制的聚焦超声波束向指定区域发射短程、低频的声脉冲波，使受检组织产生微小形变，通过追踪感兴趣区域内产生的横向剪切波的传播速度，从而将组织弹性转化为一个简单的速度值。组织的硬度越大，相应剪切波的速度值也越大[17]。ARFI目前是一种具有良好应用前景的无创、快速、简单、客观、易重复的检测肝脏纤维化程度的手段。可在测量组织弹性的同时进行常规B超检査，无需更换仪器，较TE更为方便。同时，ARFI受到腹水及肝脏脂质沉积等影响较小。既往研究[18]表明，通过ARFI测得的LS在诊断显著纤维化或肝硬化方面具有与TE相似的准确性，并且不需要单独的设备，亦不易受肝周腹水的影响。在失代偿期肝硬化患者中与TE相比具有一定的优势，几乎可以在每一例患者中清晰地显示解剖结构和进行成功的测量[17]。
既往本课题组小样本研究[19]表明，在不区分病因的情况下，提示ARFI测得的LS与HVPG呈中等强度相关(r=0.449，P＜0.05)。Baveno Ⅶ共识[2]中提出HVPG是反映病毒性肝炎相关失代偿期肝硬化或失代偿期酒精性肝硬化合并门静脉高压患者门静脉压力的金标准。因此本研究纳入人群为乙型肝炎肝硬化失代偿期或酒精性肝硬化失代偿期合并门静脉高压患者。本研究评估了LS对病毒性肝炎相关肝硬化失代偿期和酒精性肝硬化失代偿期合并门静脉高压患者的诊断价值，并将其与门静脉压力值金标准HVPG进行比较。根据Pearson相关分析、Logistic回归分析及ROC曲线结果分析后认为，在临床较为常用的评估门静脉压力的无创指标中，LS对评估肝硬化型门静脉高压患者的门静脉压力具有较好的预测价值。但本研究也存在一定的不足之处，如本研究为回顾性研究，样本量较小且为单中心研究，LS临床诊断价值未来仍需多中心、大样本量的前瞻性研究进一步证实。
-
[1] KIM HS,El-SERAG HB. The epidemiology of hepatocellular carcinoma in the USA[J]. Curr Gastroenterol Rep,2019,21(4):17. [2] MEIER JC,HAENDLER B,SEIDEL H,et al. Knockdown of platinum-induced growth differentiation factor 15 abrogates p27-mediated tumor growth delay in the chemoresistant ovarian cancer model A2780cis[J]. Cancer Med,2015,4(2):253-267. [3] LEE ES,KIM SH,KIM HJ,et al. Growth differentiation factor15 predicts chronic liver disease severity[J]. Gut Liver,2017,11(2):276-282. [4] National Health and Family Planning Commission of the People's Republic of China. Diagnosis,management,and treatment of hepatocellular carcinoma(V2017)[J]. J Clin Hepatol,2017,33(8):1419-1431.(in Chinese)中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会．原发性肝癌诊疗规范(2017年版)[J]．临床肝胆病杂志，2017,33(8):1419-1431. [5] CAO GL,HU XY,GENG WM,et al. Application of multiple serum tumor markers on the diagnosis of early primary liver cancer[J/CD]. Chin J Liver Dis(Electronic Version),2018,10(4):12-16.(in Chinese)曹国磊，胡小云，耿伟明，等．血清肿瘤标志物联合检测在早期原发性肝癌诊断的应用[J/CD]．中国肝脏病杂志(电子版)，2018,10(4):12-16. [6] GUAN GW,YAO MJ,QIAN XJ,et al. Value of combined measurement of alpha-fetoprotein and alpha-fetoprotein L3%in the diagnosis of hepatocellular carcinom[J]. J Clin Hepatol,2019,35(7):1514-1519.(in Chinese)关贵文，姚明解，钱相君，等．AFP和AFP-L3%联合检测在肝细胞癌诊断中的应用价值[J]．临床肝胆病杂志，2019,35(7):1514-1519. [7] XI LT,ZHANG HX,WU AR,et al. Value of combined measurement of serum alpha-fetoprotein,Dickkopf-1,and cytoskeleton-associated protein 4 in diagnosis of hepatocellular carcinoma[J]. J Clin Hepatol,2019,35(6):1276-1279.(in Chinese)奚黎婷，张慧娴，吴爱荣，等．血清甲胎蛋白、Dickkopf相关蛋白1、细胞骨架蛋白4联合检测对肝细胞癌的诊断价值[J]．临床肝胆病杂志，2019,35(6):1276-1279. [8] XIE F,YU YC,XUE Z,et al. Screening strategy for primary hepatocellular carcinoma based on different combinations of protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ，alpha-fetoprotein,and alpha-fetoprotein-L3[J]. J Clin Hepatol,2019,35(9):1975-1979.(in Chinese)谢芳，于乐成，薛珠，等．基于PIVKA-Ⅱ、AFP和AFP-L3不同组合模式的肝细胞癌筛查策略探讨[J]．临床肝胆病杂志，2019,35(9):1975-1979. [9] WALLIN U,GLIMELIUS B,JIRSTROM K,et al. Growth differentiation factor 15:A prognostic marker for recurrence in colorectal cancer[J]. Br J Cancer,2011,104(10):1619-1627. [10] LEE DH,YANG Y,LEE SJ,et al. Macrophage inhibitory cytokine-1 induces the invasiveness of gastric cancer cells by up-regulating the urokinase-type plasminogen activator system[J]. Cancer Res,2003,63(15):4648-4655. [11] ALBERTONI M,SHAW PH,NOZAKI M,et al. Anoxia induces macrophage inhibitory cytokine-1(MIC-1)in glioblastoma cells independently of p53 and HIF-1[J]. Oncogene,2002,21(27):4212-4219. [12] BAEK SJ,KIM KS,NIXON JB,et al. Cyclooxygenase inhibitors regulate the expression of a TGF-beta superfamily member that has proapoptotic and antitumorigenic activities[J].Mol Pharmacol,2001,59(4):901-908. [13] ZHANG L,YANG X,PAN HY,et al. Expression of growth differentiation factor 15 is positively correlated with histopathological malignant grade and in vitro cell proliferation in oral squamous cell carcinoma[J]. Oral Oncol,2009,45(7):627-632. [14] WANG L,LIU Y,LI W,et al. Growth differentiation factor 15promotes cell viability,invasion,migration,and angiogenesis in human liver carcinoma cell line HepG2[J]. Clin Res Hepatol Gastroenterol,2017,41(4):408-414. [15] LIU X,CHI X,GONG Q,et al. Association of serum level of growth differentiation factor 15 with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma[J]. PLo S One,2015,10(5):e127518. [16] CHEN GG,HO RL,WONG J,et al. Single nucleotide polymorphism in the promoter region of human alpha-fetoprotein(AFP)gene and its significance in hepatocellular carcinoma(HCC)[J]. Eur J Surg Oncol,2007,33(7):882-886. [17] ZHU HJ,GU YF. Significance of combined detection of AFP,CA199,CA50 and ferr in the diagnosis of primary liver cancer[J/CD]. Chin J Clin Lab Sci(Electronic Edition),2019,8(4):268-269.(in Chinese)朱慧婧，顾益凤．血清中AFP、CA199、CA50和Ferr联合检测在原发性肝癌诊断中的意义[J/CD]．临床检验杂志(电子版)，2019,8(4):268-269. 期刊类型引用(2)
1. 柯舸，张弛，陈明锴. 门静脉高压非侵入性诊断方法的研究进展. 医学研究杂志. 2024(04): 189-192 . 
百度学术2. 陈凯，张方方，葛尚. MSCT测量门静脉系统相关指标在肝硬化门静脉高压症诊断中的应用. 肝脏. 2024(11): 1330-1333 . 百度学术其他类型引用(2)
-
下载:
百度学术
下载:
