胆汁淤积，作为肝脏疾病的一种显著临床表现，其发病率呈现出显著的上升趋势。在现有的治疗手段中，熊去氧胆酸（UDCA）已被证实对早期原发性胆汁性肝硬化（PBC）具有确切的治疗效果。然而，对于部分UDCA不耐受的PBC患者，含酒精酸被用作替代治疗方案，但其应用常伴随着不良反应的发生。更为严重的是，胆汁淤积的持续发展可能进一步导致高胆红素血症和肝损伤。因此，迫切需要研发新型的治疗策略。 研究表明，肠道微生物群具备多样化的生物学功能，其中之一便是调节宿主代谢。胆汁淤积的一个显著特征是肠道微生物群的失衡。一项临床研究指出，粪便细菌移植对PSC患者具有积极的治疗效果，这提示肠道微生物群的失调与胆汁淤积性肝病之间存在关联，调节微生物群可能对治疗胆汁淤积性疾病具有潜力。 中医（TCM）理论中，胆汁淤积亦称为黄疸。茵陈是治疗黄疸的一种常用中草药，其活性成分涵盖了抗胆汁淤积、肝保护和抗氧化应激等方面。在这些成分中，多糖是不可或缺的一部分。有报道显示，茵陈蒿多糖（APS）对大鼠妊娠期胆汁淤积和肝外胆汁淤积均表现出保护作用。但对于肝内胆汁淤积，APS的保护作用仍有待进一步研究明确。
近日，一篇名为“Artemisia capillaris Thunb. Polysaccharide alleviates cholestatic liver injury through gut microbiota modulation and Nrf2 signaling pathway activation in mice”的论文探讨了茵陈蒿多糖对胆汁淤积和肝损伤的保护作用及其机制。 患有胆汁淤积症的小鼠血清生化指标出现了明显的上升。然而，接受了低剂量和高剂量的APS治疗后，这些生化指标均出现了显著的降低。除此之外，胆汁淤积小鼠的肝脏损伤情况，包括中性粒细胞浸润和肝细胞坏死的程度也有所增加。经APS处理后，这些情况均得到了明显的改善。结果表明，APS对于胆汁淤积性肝损伤具有显著的治疗作用。 在Vehicle+ANIT组胆汁淤积小鼠中，血清中牛磺酸结合、甘氨酸结合以及未结合TBA的浓度均有显著升高。但APS治疗之后，相关水平有所降低。同时，胆汁淤积小鼠肝脏组织中的BA含量也有所增加，而APS则能够降低牛磺酸结合BAs和TBAs的浓度。 为深入探索APS如何影响BA的稳态，研究利用实时PCR技术检测了BA摄取转运蛋白、外排转运蛋白、代谢酶以及合成酶的表达情况。结果显示，APS并未对胆汁淤积小鼠肝脏组织中Fxr、Pxr、Tgr5和Car的表达产生显著影响。然而，接受APS治疗后，胆汁淤积小鼠肝脏组织中Nrf2及其下游外排转运体Mrp2、Mrp3和Mrp4的mRNA表达水平均显著上调。 进一步地，通过免疫荧光染色技术，研究者观察到APS治疗后，Nrf2在肝脏细胞核中的表达显著增加，而在胞质溶胶中的表达则相应减少，MRP2、MRP3和MRP4的蛋白表达也在APS的作用下得到上调。 综上所述，APS通过上调Nrf2及其下游外排转运体的表达，促进了BA的排泄，从而减少了BA在肝脏组织中的积聚。 经APS给药处理后，胆汁淤积小鼠肝脏内Nrf2下游基因的mRNA表达水平得到上调，其中包括Ho-1、Nqo-1和Gclc。此外，APS还能显著降低胆汁淤积小鼠体内活性氧自由基（ROS）的表达水平。研究发现，APS在胆汁淤积小鼠的肝组织中显著上调了HO-1、NQO1、GCLC和GCLM蛋白的表达。总之，APS通过诱导Nrf2下游抗氧化基因的表达，有效减少了氧化性肝损伤的发生。 在Nrf2基因敲除的小鼠模型中，当胆汁淤积发生时，其血清生化指标水平出现了明显的上升，然而，经过APS处理后，并未观察到这些指标的改善。此外，对患有胆汁淤积症的Nrf2基因敲除小鼠进行APS处理，其肝细胞浸润和坏死的情况也并未得到明显缓解。这些结果进一步确认了APS对肝损伤的保护作用需要依赖于Nrf2的激活状态。 在Vehicle+ANIT组中，观察到胆汁淤积小鼠（Nrf2−/−）血清和肝组织中的牛磺酸结合、甘氨酸结合以及非结合型胆汁酸（BA）水平均有显著上升，而APS对此并无缓解作用（图6A-D）。进一步分析显示，在胆汁淤积的Nrf2敲除小鼠中，APS原本对肝组织中Mrp2、Mrp3和Mrp4的mRNA及蛋白表达上调作用被完全消除。 此外，在胆汁淤积的Nrf2敲除小鼠中，APS并未能增加肝脏Nrf2下游抗氧化基因的表达。同时，APS也未能降低胆汁淤积的Nrf2敲除小鼠肝脏中的活性氧（ROS）水平。结果明确表明APS对胆汁酸稳态以及胆汁淤积性氧化损伤的影响是依赖于Nrf2途径的。 经对肠道微生物群的数据分析。在α多样性分析中，Sobs指数在Vehicle、ANIT和APS处理组之间并无显著差异。然而，在β多样性分析中，通过主坐标分析（PCA）和非度量多维标度分析（NMDS）揭示，Vehicle、ANIT和APS处理组的微生物群组成存在显著差异。 为了更直观地了解不同组（Vehicle、ANIT、APS）间共享的操作分类单元（OTU）及OTU的平均数量，研究采用了维恩图进行可视化）。在门水平上，与Vehicle组相比，ANIT组中拟杆菌门和变形菌门的丰度有所增加，而厚壁菌门的丰度则降低；相反，APS处理组则表现出变形菌门和厚壁菌门的丰度降低，而丰度增加的趋势。 在科水平上，研究发现ANIT组中肠杆菌科的丰度增加，而毛螺菌科的丰度减少；而APS给药后，这些组成变化得到了逆转。在属水平上，APS显著增加了胆汁淤积小鼠肠道中产生短链脂肪酸（SCFA）的细菌（如罗氏菌和乳杆菌）的数量，并降低了条件致病菌（如肠球菌）的数量。这些结果表明，APS能够有效改善胆汁淤积小鼠的肠道微生物群失调状况。
结果显示，APS能够通过调节微生物群和激活Nrf2信号通路，有效缓解胆汁淤积性肝损伤的症状。这一发现为胆汁淤积性肝病治疗提供了新的科学依据，为其靶向肠道微生物群的治疗策略提供了有力证据。
摘译自CAI J, ZHU Z, LI Y, et al. Artemisia capillaris Thunb. Polysaccharide alleviates cholestatic liver injury through gut microbiota modulation and Nrf2 signaling pathway activation in mice[J]. J Ethnopharmacol, 2024, 327: 118009. DOI: 10.1016/j.jep.2024.118009.
转自梅斯医学
